重视印迹细胞学检查在眼表肿瘤诊断中的作用

　　印迹细胞学检查被广泛用于眼表肿瘤(上皮细胞及黑色素细胞来源)的诊断及治疗后的随诊。与手术后标本组织病理学检查相比，印迹细胞学检查技术具有对患者眼表组织无创、操作简便、可提供较为完整和保存良好的上皮细胞等优点。对于某些非手术病例，印迹细胞学检查对疾病的早期诊断及治疗过程中的随诊具有重要的意义。本文针对印迹细胞学检查在眼表肿瘤诊断中的作用进行评述，以期引起临床的关注和重视。

　　关键词：眼肿瘤；细胞学技术；随访研究

　　眼表肿瘤包括角结膜良性和恶性肿瘤及癌前病变。这些疾病的临床诊断多是依靠经验丰富的眼科医师采用裂隙灯检查法完成，但是并非所有的眼表肿瘤均可通过临床观察获得准确的诊断结果，组织病理学检查才是确诊的金标准。但是，组织病理学检查需通过手术来获取标本，而部分眼表肿物并不需要手术治疗，因此临床医师仅能通过自己的经验判断并随诊眼表肿瘤，其中不乏漏诊及误诊病例。眼表印迹细胞学检查可获得眼表较为完整、保存良好的上皮细胞，对判断病变性质及随诊观察起到重要作用。为此应该强调并希望临床重视印迹细胞学检查在眼表肿瘤诊断中的作用。

　　一.眼表肿瘤的早期诊断需要印迹细胞学检查技术

　　目前，临床多是采用裂隙灯检查法和凭借医师经验对眼表肿瘤进行诊断，对部分恶变或影响外观的肿瘤进行手术治疗，进而获得标本进行组织病理学诊断。这样很多眼表肿物很难获得细胞学检查结果，更谈不上早期诊断。眼表印迹细胞学检查是一种传统而有效的眼表肿物诊断方法，却一直得不到临床医师的重视，这与我们对该方法的认识不足有关。

　　眼表印迹细胞学检查是用滤膜印取眼球表面细胞，并对细胞形态特征进行细胞学分析的检查方法口。印迹细胞学检查实现眼表肿瘤的早期诊断，需关注以下4个方面：(1)上皮细胞的形态，包括鳞状化生程度、细胞核质比等；(2)杯状细胞的密度、形态以及高碘酸一Schiff(periodicacid—schiffstain，PAS)染色强度；(3)非上皮细胞的成分，如炎症细胞、黑色素细胞、微生物等；(4)非典型细胞的性状，部分细胞难以通过形态达到鉴别的目的，但通过其细胞边界不清、核扩大、核染色质粗糙等特征，可辅助判断病变性质分化不良等。

　　此外，印迹细胞学检查中的滤膜选择、细胞固定、染色方法的确定，均对明确诊断非常重要。检查眼表肿瘤，国际通用的滤膜为孔径0．025～0．450txm的醋酸纤维膜。滤膜孔径的大小决定了所收集的眼表上皮细胞的密度及光镜下细胞的分辨率”。固定方法可根据后续的研究方法，如印迹细胞学电子显微镜、印迹细胞学聚合酶链反应、印迹细胞学流式细胞学等来确定固定溶液及其浓度及时间。在上述各种方法中，印迹细胞学的光学显微镜检查仍然是最常用、最基本的方法。PAS染色、苏木精一伊红(HE)染色、改良瑞氏(Diff-Quik)染色及碳酸复红染色是4种最常用的染色方法。

　　二.利用印迹细胞学检查技术可明确眼表肿瘤的来源眼表肿瘤多来源于鳞状上皮细胞及黑色素细胞。

　　利用印迹细胞学检查技术确定眼表肿瘤的来源，对患者治疗方法的选择及预后判断至关重要。国外多项研究显示印迹细胞学检查技术诊断黑色素细胞来源眼表肿瘤的准确性(与手术后标本病理组织学检查结果对比)为83％～91％H‘71。黑色素细胞性肿瘤在印迹细胞学光学显微镜下的特点：细胞核质比增加、细胞核染色质排列紊乱、部分细胞核体积增大、有丝分裂相核质不均匀，同时这些细胞中包含黑色素。根据不典型黑色素细胞所占比例，可确定肿瘤的性质及其病变的严重程度。

　　眼表鳞状细胞肿瘤是最常见的眼表肿瘤。尽管通过其特殊的临床表现，有经验的眼科医师可以明确诊断，但是对于病变性质，单纯采用裂隙灯检查法难以判断。印迹细胞学联合免疫组织化学的方法可对眼表肿瘤的来源及性质进行初步判断。眼表鳞状细胞癌在印迹细胞学光学显微镜下的特点：细胞核体积增大(超过正常结膜细胞核的2倍)、失去正常细胞核结构、细胞核染色质粗大深染、细胞核多形性、双核或多核。若细胞核体积增大，但不超过正常结膜细胞核的2倍，伴随鳞状上皮增生，可诊断为不典型增生。

　　三.眼表肿瘤的治疗需要印迹细胞学技术进行评估眼表肿瘤的治疗方法包括手术、药物及放射治疗等

　　对于非手术治疗的眼表肿瘤，印迹细胞学的定期检查非常重要。一方面评价药物治疗的效果，另一方面评价药物或放射线对眼表的损伤程度，以便确定下一步的治疗方案。近年来，部分学者对眼表鳞状细胞肿瘤使用丝裂霉素、5一氟尿嘧啶治疗”5。1”，对药物浓度的计算、治疗时间的确定很大程度依靠印迹细胞学的检查结果。使用药物后眼表上皮细胞大小、形态，尤其细胞核出现改变(核质比、染色质等)，伴随着肿瘤的消失，眼表印迹细胞学检查发生重要的变化。同时，印迹细胞学检查可显示药物对眼表杯状细胞的破坏以及诱发的炎性反应变化，医师应根据印迹细胞学检查结果随时调整诊疗方案，以达到明确诊断、随访病程及预防并治疗并发症的目的。

　　小结

　　眼表印迹细胞学检查对眼表肿瘤的评估具有重要意义，但肿瘤的最终诊断主要依靠组织病理学检查结果，印迹细胞学检查不能完全代替活体的组织病理学检查。印迹细胞学检查对于部分眼表鳞状细胞肿瘤或黑色素瘤可疑病例的判定具有一定的辅助作用，可以帮助临床医师选择恰当的治疗方法，并对观察局部化学治疗药物的效果或放射治疗后眼表细胞的改变具有较为重要的作用。尽管眼表印迹细胞学检查对诊断和随诊眼表肿瘤具有重要作用，但该方法不可完全取代标本的组织病理学检查。印迹细胞学检查与组织病理学检查应优势互补，完成对眼表肿瘤的正确诊断及精准治疗。