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NanoPro1000检测流式分选肿瘤相关巨噬细胞极化蛋白

2017-12-26 来源:转化医学网  标签: 掌上医生 喝茶减肥 一天瘦一斤 安全减肥 cps联盟 美容护肤
摘要:故TAMs在STAT6磷酸化的驱动下,向M2极化,促进肿瘤进展

   巨噬细胞在生理病理过程免疫应答中有重要的作用,机体微环境信号会诱导巨噬细胞极化为两个不同功能亚群:M1和M2。在肿瘤微环境中巨噬细胞被称为肿瘤相关巨噬细胞(Tumor-Associatedmacrophages,TAMs),现有研究认为TAMS被极化为M2型巨噬细胞,促进肿瘤进展。在肿瘤细胞诱导微环境中巨噬细胞极化为M2过程中,巨噬细胞集落刺激因子(MacrophageColony-stimulatingfactor,M-CSF)起重要作用。

 
  为了研究是膜结合型巨噬细胞集落刺激因子(mM-CSF)和分泌型巨噬细胞集落刺激因子(sM-CSF)在TAMs极化中的作用机制,中国医学科学院血液病研究所实验血液学国家重点实验室郑国光研究组,在国际知名期刊Oncotarget最近一期发表文章,阐述M-CSF诱导巨噬细胞极化为M2的分子机制。
 
  在此研究中,科学家首先建立过表达mM-CSF和sM-CSF霍奇金淋巴瘤细胞系Namalwa。然后将同等量过表达细胞注射入NOD/SCID小鼠,30-35天后,当肿瘤长到1CM3,将肿瘤组织取出,流式检测发现mM-CSF,sM-CSF可以促进肿瘤相关巨噬细胞浸润和存活,同对照组比较,TMAs在肿瘤组织细胞中比例从0.12%,上升至0.53%(mM-CSF),0.68%(sM-CSF)。之后,研究人员将此群细胞分选出来,进行极化相关蛋白检测。传统方法比如Westernblot等,需要蛋白量比较大,无法用于此微量样本检测。故研究人员选用了美国Proteinsimple公司的微量蛋白免疫检测系统Nanopro1000,该系统使用400nl毛细管进行蛋白检测,极大降低蛋白使用量。研究发现STAT1较STAT6磷酸化水平下降更快,故TAMs在STAT6磷酸化的驱动下,向M2极化,促进肿瘤进展。
 
  Nanopro1000cIEFimmunoassaytechnology是美国proteinsimple公司开发,基于毛细管等电聚焦分离,使用独创蛋白质捕获技术,结合抗原抗体免疫杂交,实现在纳升级反应体系中,对干细胞等微量样品进行蛋白质修饰图谱进行解读。该系统具有全自动化,无需手工操作,可实现19小时内对96个样品进行分析的强大功能。Nanopro1000将会是精准医学蛋白质精准研究的有利工具。
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