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运用量子点单病毒示踪技术实时揭示流感病毒入胞途径

2018-07-18 来源:中国病毒学论坛  标签: 掌上医生 喝茶减肥 一天瘦一斤 安全减肥 cps联盟 美容护肤
摘要:流感病毒侵染宿主细胞时,病毒进入细胞是第一关键步骤。由于病毒与细胞表面分子间复杂的相互作用致使认识其入胞机制异常困难,而庞代文实验室基于荧光性能优异的量子点标记所建立的单病毒示踪技术为解决此难题创造了良机。

 近日,国际学术期刊《ACSNano》(IF=13.942)在线发表了病毒学国家重点实验室庞代文教授团队的最新研究成果,论文题为“Real-TimeDissectionofDistinctDynamin-DependentEndocyticRoutesofInfluenzaAVirusbyQuantumDot-BasedSingle-VirusTracking”(《量子点单病毒示踪技术实时剖析流感病毒依赖发动蛋白的不同入胞途径》)。提出病毒依赖网格蛋白内吞途径入胞时网格蛋白和发动蛋白募集的时间顺序模型,发现除网格蛋白介导内吞的主要入胞途径外,流感病毒侵染MDCK细胞的另一种不依赖网格蛋白的入胞途径。

 
流感病毒侵染宿主细胞时,病毒进入细胞是第一关键步骤。由于病毒与细胞表面分子间复杂的相互作用致使认识其入胞机制异常困难,而庞代文实验室基于荧光性能优异的量子点标记所建立的单病毒示踪技术为解决此难题创造了良机。他们采用量子点单病毒示踪技术,不仅证明了网格蛋白介导的内吞作用是流感病毒侵染MDCK细胞的主要途径,而且提出了病毒依赖网格蛋白内吞途径的时间顺序模型。此外,还发现大量最终并未入胞的病毒也诱导了持续时间较短的网格蛋白和发动蛋白募集,但只有少数病毒诱导的质膜凹陷能进入质膜分裂阶段发展成内吞囊泡。同时也发现了流感病毒的另一种不依赖网格蛋白的入胞途径,此途径也依赖于发动蛋白,但其作用有别。相较于只能获取静态平均化结果的传统研究方法,实时原位的量子点单病毒示踪技术则能实现对单个病毒入胞行为的连续可视化监测,量子点优异的荧光性能则更凸显出其在研究多重相互作用的动态分子事件方面无可比拟的优势。
 
博士生孙恩泽为该论文的第一作者,庞代文教授为通讯作者。该工作得到了科技部和国家自然科学基金委的支持。
 
参考文献:SunEZ,LiuAA,ZhangZL,LiuSL,TianZQ,PangDW.Real-TimeDissectionofDistinctDynamin-DependentEndocyticRoutesofInfluenzaAVirusbyQuantumDot-BasedSingle-VirusTracking.ACSNano.2017May23;11(5):4395-4406.
 
doi:10.1021/acsnano.6b07853
 
Abstract
 
EntryisthefirstcriticalstepfortheinfectionofinfluenzaAvirusandofgreatsignificancefortheresearchanddevelopmentofantifludrugs.InfluenzaAvirusdependsonexploitationofcellularendocytosistoenteritshostcells,anditsentrybehaviorsindistinctroutesstillneedfurtherinvestigation.Withtheaidofasingle-virustrackingtechniqueandquantumdots,wehaverealizedreal-timeandmulticolorvisualizationoftheendocyticprocessofindividualvirusesandcomprehensivedissectionoftwodistinctdynamin-dependentendocyticpathwaysofinfluenzaAvirus,eitherdependentonclathrinornot.Basedonthesequentialprogressionofproteinrecruitmentandviralmotility,wehaverevealedtheasynchronizationintherecruitmentsofclathrinanddynaminduringclathrin-dependententryofthevirus,withalargepopulationofeventsforshort-livedrecruitmentsofthesetwoproteinsbeingabortive.Inaddition,thedifferentiateddurationsofdynaminrecruitmentandresponsestoinhibitorsinthesetworouteshaveevidencedsomewhatdifferentrolesofdynamin.Besidespromotingmembranefissioninbothentryroutes,dynaminalsoparticipatesinthematurationofaclathrin-coatedpitintheclathrin-dependentroute.Collectively,thecurrentstudydisplaysadynamicandpreciseimageoftheentryprocessofinfluenzaAvirusandelucidatesthemechanismsofdistinctentryroutes.Thisquantumdot-basedsingle-virustrackingtechniqueisproventobewell-suitedforinvestigatingthechoreographedinteractionsbetweenvirusandcellularproteins.
 
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