寻找乙肝病毒的祖宗——话说慢乙肝基因诊断

　　诊病，就是要准确地找到疾病的根源。源者，祖宗也！慢乙肝的基因诊断，实际上就是要找到乙肝病毒的祖宗——乙肝病毒基因（HBVDNA）。

　　近来基因诊断一直被热炒。前任米国总统奥巴马抛出个“精准治疗”，全世界人民为此而兴奋得不行，以为人类所有疾病的诊治就像筷子夹着一颗芝麻粒，一定会精准地送到嘴里而不是鼻孔。奥巴马也因此增加了不少粉皮数，其实呢，精准，永远是一个相对的概念。在明星奥巴马吸粉龙龙阿狗（longlongago），乙肝诊断早就进入精准年代了。

　　基因是什么东西？基因是决定生物遗传性状的物质。什么？遗传性状？太晦涩了，听不懂！好吧，老缪医生让你懂。

　　你的皮肤为啥是黄色的？她的头发为何是卷曲的？儿子（亲生的）小鸡鸡的包皮为何与他爸一样过长？……？这一切都是由人类基因组的相关基因决定的。哈哈，又冒出一个“基因组”的名词。举个例子：一个公司就像一个生物体的基因组，公司的运营要靠研发部、生产车间、销售部、市场部、学术部、公共关系部、人力资源部和财务部等等部门共同完成，这些各司其职的部门就是基因。生物体越复杂，其“部门”就越多，基因组也就越大。

　　乙肝病毒的基因组大约3200个bp（basepair,碱基对），有4个基因（部门），分别是S、C、X和P基因，这4个基因分别表达不同的病毒蛋白质。比如乙肝两对半中的表面抗原由S基因表达；E抗原和核心抗原是由C基因表达后剪切；X基因表达的蛋白质叫做X蛋白；P基因表达的则是一种病毒自身复制用得到的聚合酶。

　　基因分子结构的最基本成分是嘌呤、嘧啶、磷酸和戊糖，各种生物大抵如此。不同生物的基因或同一生物个体的不同基因就像根链条，这根“链条”的骨架是由四种嘌呤和嘧啶反反复复地的排列并串在一起的，而排列的顺序，既是基因本身也是生物体的独特性之所在。

　　来做个有趣的试验吧：给甲乙二人4种颜色的卡片，共40张，黑、白、红、绿各10张，4种颜色代表4种碱基，然后让他们各自把卡片随意“洗牌”，接着再把40张卡片一张张连续地摊排在桌面上。结果你会发现，甲和乙排列出来的40张卡片的颜色顺序完全不相同，两人之间相比完全无规律可循。甲就是如左图的顺序，乙就是如右图的顺序；或者反过来说，左图的顺序就代表甲，右图的顺序只代表乙。这，就是不同个体的某个基因的独特顺序。不过从生物进化论看，这个顺序绝对不像洗牌那样随意。这个实验故事，读得懂的朋友，请多读几遍，以后还会提及；读不懂的请给我打电话咨询。

　　自从1965年乙型肝炎病毒被发现以来，医学科学家们一直致力于研究这个讨厌的病毒。上世纪80年代，乙肝病毒基因组的顺序被搞清楚了，这也就为临床基因诊断奠定了基础。医生关注的重点是如何通过发现病毒从而100%地确诊乙肝，谓之病原学诊断，也是最准确的诊断。这个关注不仅不过分，而且绝对有必要。战场上战士听到枪声，不仅要弄清楚枪声来自何方，更要确认谁在打枪；更进一步地，还要知道有多少人（敌人）在打枪。毫无疑问，从病人的体内“逮到”乙肝病毒，并掰着手指头数一数，这最可靠。

　　非常非常的遗憾，乙肝病毒颗粒太小了，小到直径只有27个纳米。纳米是什么概念？上小学时你用过20厘米尺子吗？尺子最小的那一格是1毫米对吗？一纳米就是那一格的百万分之一！纳米级的乙肝病毒比细菌小很多很多，在光学显微镜下瞅不见。所以通过发现病毒作直接病原学诊断，很难！

　　不是有电子显微镜吗？没错，乙肝病毒颗粒就是通过电子显微镜发现的，不过若用它来做临床诊断，可就太“过度”了，而且它还不一定精准，因为电镜下的确可以看得见病毒，却不一定能区分何种病毒。

　　在这样的背景下，基于病原体具有独特基因的原理而发展起来，检测乙肝病毒DNA的技术方法就应运而生，并很快地被并广泛应用于临床。最早检测HBVDNA的方法叫“杂交”法，这种方法敏感度太低，检测过程很繁琐，又不能定量。及至上世纪90年代初，科学家发明了一种叫做“聚合酶促链式反应（PCR）”的基因扩增技术，它能够从微升级的标本里，把想要检测的基因扩增到数亿到数十亿倍！敏感度极大提高。有人夸张地形容：一个基因掉在游泳池里，也能通过PCR扩增出来。现在全球都用PCR技术检测HBVDNA。

　　我说过，一个疾病的诊断，绝对不仅仅是获得一个诊断名称就能满足。同样，乙肝病毒的基因诊断，也远远不止步于获知病毒“祖宗”的有无，还有很多有益于病情判断、预后评估、疗效预测和疾病随访的“诊断”方法。目前临床上常用的乙肝病毒基因诊断方法或目的至少有四：

　　第一，检测出HBVDNA的有无，此为定性诊断；

　　第二，明确血液中病毒DNA的含量，这属于定量诊断；

　　第三，乙肝病毒有多个长相很接近的堂兄弟，弄清病人家住了哪位兄弟，这叫乙肝病毒基因分型；

　　第四，抗病毒治疗之后发生了病毒反攻，那就有必要了解病毒基因是否变异了，此乃耐药基因分析。

　　总之，针对乙肝病毒的“寻祖”过程和路径很复杂，但临床意义非常大。待后续。