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超微量高灵敏细胞因子检测技术

2017-12-22 来源:转化医学网  标签: 掌上医生 喝茶减肥 一天瘦一斤 安全减肥 cps联盟 美容护肤
摘要:细胞因子是由细胞合成和分泌的,调节细胞生理功能的蛋白质及多肽

 

 
  细胞因子是由细胞合成和分泌的,调节细胞生理功能的蛋白质及多肽,它们参与免疫性疾病、炎症等多种疾病,因此需要在临床样品中监测其含量变化。
 
  传统的酶联免疫吸附测定法(ELISA)灵敏度不够高,某些细胞因子的含量在健康人群样本(常用作对照组)中无法检出,而且ELISA需要的样本量较大,对于珍贵的样本,如果只有100uL体积的话,一次只能检测一个细胞因子。此外,人工ELISA时间长、步骤多,而自动化ELISA设备涉及大量的管路和液体,需要日常维护。后来发展的各种固相和液相芯片技术在一定程度上解决了ELISA的问题,但同时也带来了新的问题--多重检测时样本与多种抗体反应,交叉反应(cross-reactivity)难以避免,造成检测背景增高,检测灵敏度降低,所以固相和液相芯片技术更适合早期靶点的筛选,而不适合临床前和临床研究。
 
  为了解决这个困局,美国ProteinSimple公司开发了超微量高灵敏细胞因子检测系统--Ella,创新地使用微流体技术控制超微量玻璃反应管(GlassNano-Reactor,GNR)进行反应,每一个GNR相当于ELISA板上的一个小孔,从而有效地避免了多重检测时的交叉反应。
 
  早在2011年,美国ProteinSimple公司于位于瑞士巴塞尔的罗氏制药早期研究和开发部门(pRED,主要负责免疫性疾病和代谢病的研究)开展了Ella的试点研究。罗氏制药的结果显示,对于白介素10,QuantikineELISA试剂盒(行业内ELISA检测金标准试剂盒)的最低检出限是7.813pg/mL,40例健康人群内无一例可以检出。而Ella的最低检出限时1.563pg/mL,350例健康人群和抑郁症患者中只有一例未能检出,其余浓度0.9-16pg/mL不等,中位浓度2.9pg/mL。pRED也有许多珍贵的样本,如人眼房水和小鼠脑脊液,通常只有100uL体积,以前用传统ELISA只能分析一个细胞因子,而现在用Ella可以分析多达8种不同的细胞因子。加上Ella操作简便,只需加入样品和洗液,70分钟即可得到结果,日常无需维护,人员也无需特殊培训,因此罗氏制药先后引进了4台Ella,分别用于神经科学、肿瘤学和眼科学方向的研究。
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