目的观察黄芪甲苷对于中波紫外线(UVB)损伤的人表皮细胞的保护作用,探讨其相关机制。
方法将培养的永生化人皮肤角质形成细胞(HaCaT细胞)分为对照组、UVB组、黄芪甲苷组和UVB+黄芪甲苷组,其中UVB组和UVB+黄芪甲苷组细胞接受50mJ/cm2UVB照射,加药组加入不同浓度的黄芪甲苷(10、20、50、100、200mg/L)进行干预,24h后CCK8法检测细胞活性。根据CCK8法检测结果选择最佳药物浓度(20mg/L)进行后继实验。照光后继续培养24h,流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western印迹法检测HaCaT细胞中p53、p38、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和高迁移率族蛋白A1(HMGA-1)的表达。
结果与对照组相比,10mg/L和20mg/L黄芪甲苷组对HaCaT细胞的增殖活性无明显影响(F=1.32,P>0.05),50、100和200mg/L黄芪甲苷对细胞增殖活性有一定抑制作用(F=20.20,P<0.05);UVB组与对照组比较,HaCaT细胞增殖活性显著下降(F=99.00,P<0.01)。与UVB组相比,UVB+黄芪甲苷(10~200mg/L)组HaCaT细胞增殖活性不同程度升高(F=19.08,P<0.01),其中UVB+20mg/L黄芪甲苷组升高程度最高。进一步实验表明,与UVB组相比,UVB+20mg/L黄芪甲苷组ROS产生受到明显抑制(t=21.12,P<0.01)。Western印迹结果表明,与对照组比较,UVB组p53、p38、MMP-9和HMGA-1蛋白的表达升高(均P<0.01),而UVB+20mg/L黄芪甲苷组细胞内p53、p38、MMP-9和HMGA-1蛋白的表达水平较UVB组显著降低(P<0.01)。
结论黄芪甲苷可有效抑制UVB引起的表皮细胞光损伤。
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