β联蛋白对过氧化氢诱导人皮肤成纤维细胞增殖活性及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

　　目的观察高表达的β联蛋白对过氧化氢（H2O2）诱导衰老人皮肤成纤维细胞（HSF）增殖活性以及凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响。

　　方法实验分3组。HSF细胞分别转染pcDNA3.1-β联蛋白或空载体pcDNA3.1，然后150μmol/LH2O2处理2h。噻唑蓝检测细胞增殖活性，流式细胞仪检测细胞凋亡水平，RT-PCR和Western印迹分析凋亡相关基因Bcl-2、Bax的表达。

　　结果HSF+空载体组、HSF+空载体+H2O2组、HSF+β联蛋白+H2O2组细胞增殖活性分别为0.792±0.012、0.462±0.012、0.521±0.015，细胞凋亡率分别为（3.407±0.217）%、（24.555±1.793）%、（15.360±0.755）%，各组比较，差异有统计学意义（均P＜0.01）。HSF+空载体+H2O2组Bcl-2mRNA和蛋白水平（与GAPDHmRNA和蛋白的比值分别为0.333±0.003和0.336±0.004）明显低于HSF+空载体组（分别为0.507±0.013和0.514±0.021），两组比较，均P＜0.01。HSF+β联蛋白+H2O2组Bcl-2mRNA和蛋白水平分别为0.404±0.006和0.411±0.005明显高于HSF+空载体+H2O2组，两组比较，均P＜0.01。HSF+空载体+H2O2组BaxmRNA和蛋白水平（与GAPDHmRNA和蛋白的比值分别为0.451±0.002和0.460±0.008）明显高于HSF+空载体组，两组比较，均P＜0.01。HSF+β联蛋白+H2O2组BaxmRNA和蛋白水平（分别为0.339±0.012和0.346±0.013）明显低于HSF+空载体+H2O2组，两组比较，均P＜0.01。

　　结论高表达的β联蛋白能够提高衰老人皮肤成纤维细胞增殖活性。

　　讨论我们在研究中发现，H2O2所致的人皮肤成纤维细胞衰老模型中，氧化应激水平增高，细胞增殖活性明显降低，且细胞凋亡率明显上调；转染β联蛋白后，氧化应激反应受到一定的抑制，活性氧以及细胞凋亡率明显下调，细胞增殖活性明显提高，且延缓了细胞衰老表型。推测，β联蛋白可能是通过上调凋亡基因Bcl-2的表达以及抑制促凋亡基因Bax的活性来影响衰老的人皮肤成纤维细胞凋亡。