目的建立小鼠免疫性接触性荨麻疹动物模型。
方法将60只BALB/c小鼠随机分5组:抗二硝基苯酚IgE单克隆抗体(抗DNPIgE)+二硝基氟苯(DNFB)组和抗DNPIgE+偏苯三酸酐(TMA)组小鼠尾静脉注射抗DNPIgE,24h后分别在小鼠耳部涂DNFB和TMA;DNFB组、TMA组、生理氯化钠液(NS)组小鼠尾静脉注射NS,24h后分别在小鼠双耳涂DNFB、TMA、NS,观察小鼠在14d内的风团、瘙痒情况、肥大细胞脱颗粒数、脾脏指数和皮肤病理。
结果抗DNPIgE+DNFB组全部(12/12)和抗DNPIgE+TMA组部分小鼠(8/12)产生风团;抗DNPIgE+DNFB组及抗DNPIgE+TMA组小鼠的搔抓次数[30min时分别为(31.58±3.58)次/h,(22.17±3.81)次/h]、肥大细胞脱颗粒率[(70.21±26.01)%,(54.25±39.57)%]及脾脏指数(7.54±1.56,7.87±1.18)与NS组[(2.00±0.85)次/h,(14.45±6.79)%,5.37±1.16]相比均显著增加(F值分别为437.86、14.41、4.29,均P<0.01);DNFB组、TMA组及NS组均无风团产生。
结论通过抗DNPIgE诱导及DNFB激发后可快速、较稳定地建立小鼠免疫性接触性荨麻疹动物模型。
讨论
接触性荨麻疹主要表现为接触致敏物后出现皮肤发红、风团、瘙痒,可分为免疫性和非免疫性。免疫性接触性荨麻疹的皮疹可以局限于接触部位,也可以累及未接触部位,甚至泛发全身。
本实验中抗DNPIgE+DNFB组全部小鼠出现风团,而抗DNPIgE+TMA组约三分之二小鼠出现风团,且抗DNPIgE+DNFB组在风团数与风团大小均大于抗DNPIgE+TMA组,说明在抗DNPIgE致敏的条件下,DNFB造模的效果优于TMA。由于风团出现在激发部位以外的地方,且是接触诱发,故本次荨麻疹的动物模型考虑为免疫性接触性荨麻疹动物模型。另外,抗DNPIgE+DNFB组出现Ⅰ型和Ⅳ型变态反应,与接触性荨麻疹相似。
本研究中抗DNPIgE+DNFB组、抗DNPIgE+TMA组小鼠的肥大细胞脱颗粒细胞率明显高于NS组,提示此方法能激发小鼠激活肥大细胞脱颗粒,使小鼠体内出现高敏状态,出现免疫内环境的改变。估计其激活的原因早期与IgE升高有关,后期则与继发的炎症介质有关。而且,抗DNPIgE+DNFB组及抗DNPIgE+TMA组脾脏指数与NS组比较均明显增高,提示脾脏参与了抗DNPIgE+DNFB组及抗DNPIgE+TMA组小鼠的免疫反应。