中波紫外线(UVB)是造成皮肤光损伤的主要原因,其引起皮肤光损伤机制复杂,最重要一点是通过氧化应激产生过多活性氧,破坏细胞膜、线粒体膜及使各种细胞酶类失活,影响相关细胞信号转导和基因表达,导致细胞损伤、细胞凋亡或癌变。微量元素硒是机体重要的抗氧化酶谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的必需组分,具有抗氧自由基的作用,与人体健康密切相关。硒代蛋氨酸是一种重要的硒化合物,可作为较安全的有机硒来源。
目的
研究硒代蛋氨酸对中波紫外线(UVB)致HaCaT细胞氧化损伤的影响及其可能机制。
方法
培养HaCaT细胞,分为4组:①正常对照组,不做任何处理;②硒代蛋氨酸组:分别加入1、10、50、100、200nmol/L和1μmol/L硒代蛋氨酸预孵育24h;③UVB组:30、60、90mJ/cm2UVB照射;④硒代蛋氨酸+UVB组:不同浓度硒代蛋氨酸预孵育24h后进行不同剂量UVB照射。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,比色法检测超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)水平。采用析因设计方差分析、单因素方差分析对数据进行统计学分析,多重比较采用LSD法。
结果
析因设计方差分析结果显示,UVB照射对细胞增殖活性有抑制作用(F=128.04,P<0.05),且随UVB强度增加,细胞增殖活性逐渐下降,组间差异有统计学意义(P<0.05);硒代蛋氨酸预孵育对细胞增殖活性也有影响(F=5.95,P<0.05),其中10nmol/L~1μmol/L硒代蛋氨酸+UVB组与UVB组比较,细胞增殖活性显著升高(P<0.05);UVB照射和硒代蛋氨酸对细胞增殖活性无明显交互作用(F=1.65,P>0.05)。30mJ/cm2UVB照射后,UVB组凋亡率(31.9%±2.67%)较正常对照组(4.1%±0.67%)显著升高(P<0.05);而10、50、100、200nmol/L和1μmol/L硒代蛋氨酸+30mJ/cm2UVB组凋亡率[依次为:(21.9±3.72)%、(17.2±1.67)%、(4.6±0.85)%、(7.5±1.86)%、(13.5±1.95)%]均较30mJ/cm2UVB组凋亡率显著下降(P<0.05)。30mJ/cm2UVB组与正常对照组相比,SOD和GSH-Px活性降低,MDA含量升高(P<0.05);10nmol/L~1μmol/L硒代蛋氨酸+30mJ/cm2UVB组与30mJ/cm2UVB组比较,SOD和GSH-Px活性增高,MDA含量下降(P<0.05)。
结论
硒代蛋氨酸可以减轻UVB诱导HaCaT细胞氧化损伤,其机制与增强抗氧化酶活性、减少氧自由基有关。
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