胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞生长的影响

2017-05-24 来源：中华皮肤科杂志标签：掌上医生喝茶减肥一天瘦一斤安全减肥 cps联盟美容护肤

摘要：用不同浓度胰蛋白酶处理A431细胞，通过检测细胞生长活性发现，随着胰蛋白酶浓度升高，A431细胞增殖活性增加；100nmol/L胰蛋白酶处理A431细胞后，与对照组相比，G1期细胞比例减少，S期细胞比例增高，细胞增殖指数、细胞迁移能力和黏附潜能增加，差异均有统计学意义（均P<0.05）。

　　许多恶性肿瘤中均发现有肥大细胞增生，但其意义尚不清楚。胰蛋白酶是肥大细胞的重要产物，我们用细胞生物学方法研究胰蛋白酶处理人皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）细胞系A431细胞后，对其增殖、迁移、黏附的影响，探讨胰蛋白酶促进肿瘤生长的相关机制。

　　目的

　　探讨胰蛋白酶对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、迁移和黏附能力等生物学行为的影响。

　　方法

　　用不同浓度的胰蛋白酶处理A431细胞，通过CCK8法检测细胞活性，筛选胰蛋白酶作用的最佳浓度；流式细胞仪检测癌细胞增殖周期细胞百分率和增殖率；划痕和Transwell小室实验分别检测癌细胞在二维和三维空间的迁移能力；纤连蛋白粘附试验检测癌细胞的黏附潜能。

　　结果

　　用不同浓度胰蛋白酶处理A431细胞，通过检测细胞生长活性发现，随着胰蛋白酶浓度升高，A431细胞增殖活性增加；100nmol/L胰蛋白酶处理A431细胞后，与对照组相比，G1期细胞比例减少，S期细胞比例增高，细胞增殖指数、细胞迁移能力和黏附潜能增加，差异均有统计学意义（均P<0.05）。

　　结论

　　胰蛋白酶能促进A431细胞增殖、迁移和黏附。

　　讨论

　　胰蛋白酶是肥大细胞合成和分泌的特异性活性蛋白酶，可活化一些与肿瘤侵袭相关的蛋白酶，如尿激酶前体、基质金属蛋白酶等，从而导致肿瘤的浸润。本研究用4个不同浓度胰蛋白酶处理A431细胞，发现随着胰蛋白酶浓度升高A431细胞增殖活性增加，说明胰蛋白酶对A431的生长促进作用呈剂量依赖性。流式细胞仪观察到胰蛋白酶处理A431细胞24、48、72h后，G1期细胞均少于对照组，S期细胞均多于对照组；胰蛋白酶处理后24、48h细胞增殖指数与对照组比较，差异有统计学意义，表明胰蛋白酶显著促进肿瘤细胞增殖。几乎所有的肿瘤都有细胞周期调控机制破坏，导致细胞生长失控、分化受阻。胰蛋白酶促进肿瘤细胞增殖的机制尚待进一步研究。