目的
探讨白细胞介素22(IL-22)对HaCaT细胞他扎罗汀诱导基因3(TIG3)表达的影响。
方法
用12.5~100μg/LIL-22、IL-22+PD98059(MAPK-ERK1/2通路抑制剂)及IL-22+AG490(JAK2/STAT3通路抑制剂)干预处理HaCaT细胞24h后,分别提取HaCaT细胞总蛋白及总RNA,用免疫荧光、Western印迹法、ELISA法检测TIG3的蛋白水平,用实时荧光定量RT-PCR检测TIG3mRNA水平的改变。
结果
免疫荧光检测显示,HaCaT细胞内TIG3蛋白主要表达在细胞质。用Western印迹法检测,用12.5、25、50、100μg/L的IL-22干预处理后,HaCaT细胞中TIG3蛋白表达分别为0.743±0.035,0.678±0.040,0.582±0.041和0.328±0.032,均低于对照组0.839±0.045(P<0.05)。酶联免疫法检测的结果示,上述浓度的IL-22干预处理后,TIG3蛋白水平变化的趋势与Western印迹法的结果一致。定量RT-PCR检测示TIG3mRNA分别为对照组的0.838±0.036,0.686±0.061,0.565±0.047,0.457±0.033(P<0.05)。加入信号通路抑制剂后,TIG3蛋白和mRNA水平降低程度较无抑制剂组减少,差异有统计学意义。
结论
IL-22可剂量依赖抑制HaCaT细胞TIG3的表达,其机制可能与MAPK-ERK1/2和JAK2/STAT3通路有关。
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