腺病毒介导IL-24基因诱导皮肤鳞状细胞癌细胞COLO 16的凋亡

2017-05-23 来源：中华皮肤科杂志标签：掌上医生喝茶减肥一天瘦一斤安全减肥 cps联盟美容护肤

摘要：Ad-IL-24可诱导鳞癌细胞COLO16细胞凋亡，其机制可能与上调Bax基因、下调Bcl-2基因表达，并活化caspase3有关。

　目的

　　探讨腺病毒介导IL-24基因表达载体（Ad-IL-24）对皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）细胞COLO16凋亡的影响，并探讨其作用机制。

　　方法

　　将构建的Ad-IL-24腺病毒感染COLO16细胞，qPCR法检测IL-24基因的表达，MTT法检测IL-24过表达对细胞生长的影响，流式细胞仪检测IL-24过表达对COLO16细胞凋亡的影响，激光扫描共聚焦显微镜观察在IL-24过表达后COLO16细胞凋亡的形态变化，Western印迹检测Bax，Bcl-2以及活化的caspase3蛋白水平，qPCR法检测Bax、Bcl-2基因mRNA的表达，免疫荧光法检测IL-24过表达后Bax，Bcl-2的表达情况。

　　结果

　　MTT结果显示，Ad-IL-24组的细胞从第4天开始出现明显抑制，第6天差异最明显（P<0.05），并呈现时间依赖性，而Ad-GFP组与对照组比较，差异无统计学意义（P>0.05）。流式细胞仪显示，Ad-IL-24组的COLO16细胞凋亡率（13.10±0.92）%，显著高于对照组（3.69±0.36）%（P<0.05）和空载体组（3.39±1.06）%（P<0.05），后两组间比较，差异无统计学意义（P>0.05）。激光扫描共聚焦显微镜显示，Ad-IL-24组细胞加速凋亡。免疫荧光、Western印迹法和qPCR法结果显示，IL-24过表达后Bax在细胞中的表达明显升高，而Bcl-2在细胞中的表达却明显下降。Western印迹法和qPCR法显示，Ad-IL-24组的Bax、Bcl-2的蛋白及mRNA水平分别与对照组和空载组比较，出现了明显的上升和下降，在蛋白水平上产生与抗cleavedcaspase3抗体结合的特异性条带。

　　结论

　　Ad-IL-24可诱导鳞癌细胞COLO16细胞凋亡，其机制可能与上调Bax基因、下调Bcl-2基因表达，并活化caspase3有关。