川芎嗪对UVA诱导人皮肤成纤维细胞衰老的拮抗作用及MMP-1、MMP-3 mRNA表达影响

2017-05-23 来源：中华皮肤科杂志标签：掌上医生喝茶减肥一天瘦一斤安全减肥 cps联盟美容护肤

摘要：酶消化法分离HDF进行原代培养，用不同浓度川芎嗪分别作用UVA多次照射前后的HDF。CCK-8法检测川芎嗪作用24、48、72h或川芎嗪预处理24h进行多次UVA照射的各组HDF体外增殖情况。光学显微镜下观察经多次UVA照射的各组细胞形态变化及β半乳糖苷酶染色情况，实时荧光定量PCR检测各组细胞内MMP-1和MMP-3mRNA相对表达量。

　　目的

　　探讨川芎嗪对长波紫外线（UVA）诱导人皮肤成纤维细胞（HDF）衰老的拮抗作用及对基质金属蛋白酶（MMP）-1和MMP-3mRNA表达的影响。

　　方法

　　酶消化法分离HDF进行原代培养，用不同浓度川芎嗪分别作用UVA多次照射前后的HDF。CCK-8法检测川芎嗪作用24、48、72h或川芎嗪预处理24h进行多次UVA照射的各组HDF体外增殖情况。光学显微镜下观察经多次UVA照射的各组细胞形态变化及β半乳糖苷酶染色情况，实时荧光定量PCR检测各组细胞内MMP-1和MMP-3mRNA相对表达量。

　　结果

　　浓度为20、50mg/L的川芎嗪作用HDF24、48、72h对细胞的体外增殖活性无促进或抑制作用，但100mg/L作用48h对HDF出现短暂抑制作用，与未给药组比较细胞增殖活性差异有统计学意义（P<0.05）。20、50、100mg/L的川芎嗪预处理HDF24、48、72h对经多次UVA照射的HDF体外增殖均有一定的促进作用，各组间细胞增殖活性在3个时间点差异有统计学意义（均P<0.01）。多次UVA照射后HDF形态出现体积变大、颗粒增加及β半乳糖苷酶表达增加等衰老现象，接近复制性衰老的HDF（P55组）。而20、50、100mg/L的川芎嗪预处理HDF24h可减轻这种衰老现象，其中UVA组β半乳糖苷酶阳性率（68.417±1.181）%，UVA+川芎嗪20mg/L组（58.167±5.620）%，UVA+川芎嗪50mg/L组（45.167±5.502）%，UVA+川芎嗪100mg/L组（43.000±2.000）%，未照射组（33.667±5.865）%，P55组（76.000±6.557）%，各组间差异有统计学意义（P<0.01），且UVA+各浓度川芎嗪组、未照射组与UVA组比较差异有统计学意义（均P<0.05）。川芎嗪可降低多次UVA照射诱导的HDF表达MMP-1和MMP-3mRNA，且UVA+各浓度川芎嗪组、未照射组与UVA组比较差异有统计学意义（均P<0.05）。

　　结论

　　川芎嗪对多次UVA照射诱导的HDF衰老有拮抗作用，并能降低HDF衰老过程中MMP-1和MMP-3mRNA的表达。