目的
探讨长波紫外线(UVA)对人皮肤成纤维细胞(HSF)自噬水平的影响。
方法
HSF慢性UVA照射分组:未照射组、5J/cm2组、10J/cm2组和20J/cm2组,每天照射1次连续4d;HSF急性照射分组:未照射组、5J/cm2组、10J/cm2组、30J/cm2组和60J/cm2组,单次照射。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐分析法(MTT)检测细胞增殖活力。单丹酰戊二胺染色法(MDC)检测细胞自噬体。Western印迹法检测细胞LC3蛋白LC3-I向LC3-II转化分析(LC3-II/LC3-I)。
结果
与未照射组HSF比较,5、10、20J/cm2慢性UVA照射组细胞增殖活力降低(F=155.5,P<0.05)。与未照射组HSF比较,5、10、30、60J/cm2急性UVA照射后1、6和12h,细胞增殖活力均降低(F值分别为1335、1649、2774、均P<0.05)。MDC法标记细胞自噬囊泡,与未照射组比较,5、10、20J/cm2慢性照射均可上调细胞自噬水平(F=748.62,P<0.05),而5、10、30、60J/cm2急性照射后1、6和12h对细胞自噬水平无明显影响(F值分别为0.014、0.004、0.002,均P>0.05)。5、10和20J/cm2慢性照射组LC3-I向LC3-II转化(LC3-II/LC3-I)均增加(t值分别为9.002、21.772、18.33,均P<0.05),细胞自噬水平上调。与未照射组比较,5、10、30、60J/cm2急性照射后1、6和12h,细胞LC3-I向LC3-II转化均无明显变化(F值分别为0.13、0.27、0.06,均P>0.05),对细胞自噬水平无明显影响。
结论
慢性UVA照射可上调HSF自噬水平,急性UVA照射HSF自噬无明显变化。