目的
探讨靶向沉默趋化因子受体CXCR7基因对黑素瘤细胞株M14侵袭和迁移能力的影响。
方法
首先采用Western印迹实验检测黑素瘤M14和A375细胞CXCR7蛋白的表达,选取高表达CXCR7蛋白的M14细胞作为研究对象。将M14细胞分为实验组、阴性对照组和空白对照组:实验组转染CXCR7-siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做任何处理。采用Real-timePCR和蛋白质印迹法分别检测CXCR7mRNA和蛋白在M14细胞中的表达水平,Transwell小室法及细胞划痕法检测干扰前后对细胞侵袭及迁移能力的影响。
结果
实验组M14细胞CXCR7mRNA及蛋白相对表达量明显低于阴性对照组以及空白对照组(F值分别为30.068,11485.5,P值分别为0.001、0.000);实验组M14细胞穿过聚碳酸酯膜的细胞数明显少于阴性对照组和空白对照组(F=32.416,P=0.001);划痕实验中,实验组每高倍视野下细胞迁移数明显少于阴性对照组和空白对照组(F=2411.945,P=0.000),三组间比较差异均有统计学意义。
结论
靶向沉默CXCR7能显著抑制黑素瘤M14细胞的侵袭、迁移能力,有望为皮肤黑素瘤提供潜在的治疗靶点。