目的
探讨绿原酸在乙二醛诱导的人皮肤成纤维细胞衰老中的保护作用。
方法
使用1mmol/L乙二醛处理体外培养的人皮肤成纤维细胞,构建细胞衰老模型。用5~80μmol/L绿原酸和乙二醛共同处理人皮肤成纤维细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,筛选出绿原酸的有效浓度。1mmol/L乙二醛分别与有效浓度的绿原酸(10、20、40μmol/L)共同作用于成纤维细胞,细胞衰老β半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法及实时荧光定量PCR法检测衰老细胞比例和衰老基因p16INK4amRNA的表达情况。
结果
与空白对照组相比,乙二醛可明显抑制人皮肤成纤维细胞增殖,两组差异有统计学意义(P<0.01)。与乙二醛组细胞增殖相比,乙二醛+10、20、40、80μmol/L绿原酸组对细胞增殖均有不同程度的促进作用,40μmol/L绿原酸达高峰,80μmol/L绿原酸与40μmol/L组相比,细胞活力差异无统计学意义(P>0.05),因此筛选出绿原酸的有效浓度为10~40μmol/L。与空白对照组比较,加入乙二醛后,衰老细胞明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。与乙二醛组细胞SA-β-gal染色阳性率相比,分别加入10、20、40μmol/L绿原酸与乙二醛共培养后,细胞SA-β-gal染色阳性率呈剂量依赖性减少,差异均有统计学意义(P<0.05)。与空白对照组比较,乙二醛组衰老基因p16INK4amRNA的表达明显增高(P<0.01),分别加入10、20、40μmol/L绿原酸与乙二醛共培养后表达下降(均P<0.05)。
结论
绿原酸在乙二醛致人皮肤成纤维细胞衰老中具有潜在的保护作用。
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