茶多酚如何对皮肤发挥抗氧化保护作用?
摘要:刺激因素在一定程度上会造成各种皮肤细胞氧化应激损伤,从而导致如日晒伤、光老化、黑素瘤、自身免疫性皮肤病、皮肤异常纤维化等多种皮肤疾病的发生
皮肤作为人体最大器官,是抵御外界各种理化刺激的第一道防线。刺激因素在一定程度上会造成各种皮肤细胞氧化应激损伤,从而导致如日晒伤、光老化、黑素瘤、自身免疫性皮肤病、皮肤异常纤维化等多种皮肤疾病的发生。茶多酚具有强大的抗氧化作用,文献报道其主要通过直接清除活性氧自由基,抑制脂质过氧化反应,诱导氧化的过渡金属离子络合,激活细胞内抗氧化防御系统这几条途径发挥抗氧化作用。核转录因子Bach1与Nrf2均属于亮氨酸拉链家族中一员,参与调控抗氧化应激反应。梁碧华等采用适宜浓度茶多酚孵育人皮肤成纤维细胞(HSF),观察其对Nrf2/Bach1mRNA及Nrf2/Bach1核蛋白表达及分布的影响,探讨茶多酚抗氧化机制。
茶多酚对人皮肤成纤维细胞Nrf2/Bach1mRNA及核蛋白的影响
不同浓度茶多酚(0、2.5、5、10、20、40mg/L)孵育HSF24h,MTT法检测细胞增殖活性,筛选出适宜浓度茶多酚,并用该浓度
药物孵育HSF24h,RT?qPCR法检测Nrf2和Bach1mRNA表达,Western印迹法检测Nrf2、Bach1核蛋白表达,免疫荧光法检测Nrf2、Bach1蛋白核分布情况。
结果显示,当茶多酚浓度为5mg/L时,对HSF增殖无明显影响,故后续实验采用5mg/L茶多酚,对照组浓度为0。HSF加入茶多酚孵育后,Bach1mRNA相对表达量(0.629&plu
smn;0.077)及其核蛋白表达(1.424±0.171)均显著低于对照组(0.940±0.033;16.966±1.702),而Nrf2mRNA(1.467±0.076)及其核蛋白表达(6.929±0.121)均显著高于对照组(0.977±0.091;3.537±0.126),差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光结果显示,Nrf2蛋白在细胞核内的聚集增多,Bach1蛋白在细胞核内聚集减少。提示茶多酚可促进Nrf2mRNA、Nrf2核蛋白的表达及核分布,抑制Bach1mRNA、Bach1核蛋白的表达和核分布,从而发挥抗氧化作用。