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重组变异链球菌表面蛋白的可溶性表达及抗体制备

2015-08-17 来源:健客网社区  标签: 掌上医生 喝茶减肥 一天瘦一斤 安全减肥 cps联盟 美容护肤
摘要:该研究指出,rPAc高效可溶性表达和抗rPAc多克隆抗体的制备为DNA初次免疫—蛋白质加强免疫策略的深入研究奠定了必要的物质基础。该文发表在2012年30卷03期《华西口腔医学杂志》上。

   近日,杭州口腔医院和口腔生物医学工程教育部重点实验室的研究人员共同发表基础研究论文,旨在探讨重组变异链球菌表面蛋白(rPAc)在大肠杆菌中可溶性表达的最佳诱导条件并制备其多克隆抗体。该研究指出,rPAc高效可溶性表达和抗rPAc多克隆抗体的制备为DNA初次免疫—蛋白质加强免疫策略的深入研究奠定了必要的物质基础。该文发表在2012年30卷03期《华西口腔医学杂志》上。

 
 
  通过改变pET20b(+)-AP/BL21(DE3)plysS工程菌的培养条件,提高rPAc可溶性表达水平。用纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)和Westernblot法鉴定抗体的免疫学活性。
 
  pET20b(+)-AP/BL21(DE3)plysS工程菌在Luria-Bertani(LB)培养基(pH值为7.2)上培养,至表示菌体密度的光密度值OD600nm=0.6时加入1.0mmol·L-1异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG),30℃诱导培养4h,rPAc的可溶性表达量最高。以纯化的rPAc免疫BALB/c小鼠,制备抗rPAc多克隆抗体,ELISA法测定抗体效价为1:6000,Westernblot法鉴定出该抗体可特异性识别rPAc。
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