脂多糖对成牙本质细胞细胞连接影响的体外研究
摘要:研究指出,LPS能够下调成牙本质细胞细胞连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherinmRNA的表达水平,以及E-cadherin的蛋白表达水平,对NF-κB的抑制能在一定水平上影响上述过程,表明NF-κB参与了LPS对成牙本质细胞连接的破坏。
近日,第四军医大学口腔医院牙体牙髓病科军事口腔医学国家重点实验室研究人员发表论文,旨在研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对成牙本质细胞(odontoblast-lineagecells,OLCs)细胞连接的影响。研究指出,LPS能够下调成牙本质细胞细胞连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1、E-cadherinmRNA的表达水平,以及E-cadherin的蛋白表达水平,对NF-κB的抑制能在一定水平上影响上述过程,表明NF-κB参与了LPS对成牙本质细胞连接的破坏。该文发表在2014年第04期《牙体牙髓牙周病学杂志》上。
在细胞培养体系中加入不同浓度LPS(10、100、1000ng/mL)作用于OLCs,并以条件培养基(10ng/mLLPS)中同时加入NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(Pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)和LPS组为对照;分别培养0.5、1、2、6h各时间点采用Westernblot观察细胞连接蛋白E-cadherin水平的变化;以实时定量PCR观察细胞连接蛋白ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherinmRNA水平的改变。
经过LPS处理后,ZO-1、occludin、claudin-1和E-cadherin的mRNA表达水平明显降低,且在一定的作用时间范围内呈时间依赖性(P<0.05),但LPS在浓度10~1000ng/mL之间作用无明显差异(P>0.05)。同时,E-cadherin在蛋白水平随着LPS作用时间的延长其表达水平逐渐降低,而当加入NF-κB抑制剂PDTC时则能抑制这种效应。