骨桥蛋白对人牙髓干细胞成骨分化的旁分泌作用

　　近日，哈尔滨医科大学附属第二医院口腔修复科研究人员发表论文，旨在研究骨桥蛋白（osteopontin，OPN）对牙髓干细胞（dentalpulpstemcells，DPSCs）成骨分化的旁分泌作用。研究指出，OPN对DPSCs的旁分泌作用是促进其成骨向分化。该文发表在2014年第11期《口腔医学研究》杂志上。

　　利用四甲基偶氮唑盐（MTT）计数测定不同浓度OPN对细胞增殖的影响；测定DPSCs经不同浓度OPN诱导后的碱性磷酸酶（ALP）活性；选取适宜的诱导浓度，在倒置相差显微镜下观察诱导后的DPSCs形态变化；应用茜素红染色法检测矿化结节的形成；采用反转录聚合酶链反应（reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-RCR）分别检测DPSCs骨涎蛋白（BSP）、Runt相关转录因子2（Runx-2）、骨钙蛋白（OCN）、Ⅰ型胶原（Col-1）等骨源性基因表达情况。

　　MTT计数及ALP活性测定实验表明，随着OPN浓度增加，ALP活性增强，但细胞增殖率降低。茜素红染色显示OPN诱导培养28d后出现矿化结节。OPN诱导培养7d后DPSCs骨源性基因表达均成阳性。其中BSP、Runx-2、Col-1及OCN等基因表达水平均明显高于对照组。

（实习编辑：徐润兰）