近期,兰州市中医医院科教科研究人员发表论文,旨在利用加入突变TaqDNA聚合酶等的优化方法实现人类牙齿龈沟液中的细菌及人类基因组片段的直接扩增。研究指出,直接PCR法可以用于龈沟液中细菌的初步检测以及人类基因组小片段的扩增,也可应用于牙龈炎或牙周炎患者的口腔龈沟液研究及临床诊断。该文发表在2014年第04期《哈尔滨医科大学学报》杂志上。
随机选取10例牙龈炎患者。用无菌注射器分别吸取10μL的龈沟液。然后各吸取2μL,标记为第一组,分别加入突变TaqDNA聚合酶及DMSO,通过改变PCR反应体系,直接实现龈沟液中细菌的16sRNA及MAOA-VNTR基因的扩增;再分别吸取2μL,标记为第二组,此组先采用微量DNA提取试剂盒来实现DNA的提取,然后扩增龈沟液中细菌的16sRNA及MAOA-VNTR基因。
直接扩增法所获得的扩增产物比传统提取DNA法多2个,两种方法的转化子阳性率无差别;MAOA-VNTR可扩增出单倍体,串联体等。
(实习编辑:徐润兰)
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