羊水细胞培养染色体检查

羊水细胞培养染色体检查概述

由于有害化学物质、X线照射、环境因素影响，高龄妊娠，近亲配婚等，导致妊娠时染色体的数目、形态、结构及结合上发生变异所引起的疾病。羊水细胞的染色体检查，对染色体疾病的产前诊断具有很大的特异性意义。

• 检查部位 腹部
• 科室 妇产科
• 相关疾病 小儿脑性瘫痪 遗传病 Ehler-Danlos综合征 早产 过期妊娠 破水 难产 母儿血型不合溶血病 流产 小儿脑瘫 小儿先天性睾丸发育不全 小儿先天性卵巢发育不全 小儿猫叫综合征 小儿帕套综合征 小儿唐氏综合征 自然流产 迪格奥尔格综合征
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• 相关症状 阴囊肿大 男子性功能障碍 阴道出血 颌小 水平掌褶纹(通贯手) 耳朵位置低 流产 染色体畸形 产后出血 绝经 月经量多
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羊水细胞培养染色体检查正常值

• 染色体总数46条。
  常染色体22对(序号为1~22)。
  性染色体男性为XY，女性为XX。
  男性核型46，XY。
  女性核型46，XX。

羊水细胞培养染色体检查临床意义

• 染色体数量异常如唐氏综合征(21三体综合征)、18三体综合征、13三体综合征、8三体综合征、22三体综合征、先天性睾丸发育不全综合征、XXY综合征、特纳综合征、X三体综合征和多X体综合征等。
  染色体结构异常如4p部分单体综合征、5p部分单体综合征、9p部分三体综合征、9q部分单体综合征、21q部分单体综合征、22q部分单体综合征、22q部分三体综合征等。

羊水细胞培养染色体检查检查方法

• (1)取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml离心10min。
  (2)弃去多余上清液，留1ml羊水和沉淀细胞，轻轻打散成细胞悬液。
  (3)移入25ml方形培养瓶中，加pH6.5～6.8(含青霉素100U/ml，链霉素100μg/ml)的培养基3ml及小牛血清1ml，置37℃温箱中培养。
  (4)培养7～10天后可见大量成纤维样或上皮样细胞集落。此时可调换新鲜培养液。
  (5)待细胞集落扩大成片，并有许多透亮的圆形分裂细胞时，即可加入秋水仙素，使最终浓度为0.1～0.3μg/ml，置37℃温箱中再培养5～6h(上述过程均在无菌条件下进行)。收获标准：①以成纤维细胞为主要类型，成片细胞生长；②以10倍目镜和20倍物镜观察，生长的细胞克隆覆盖1个或1个以上完整视野；③见到10个以上透亮的圆形细胞和10个以上双圆形光亮的分裂细胞。
  (6)如果细胞生长不旺盛，生长周期不齐或细胞老化，未达收获标准，可在原瓶继续传代培养。方法：在无菌条件下先倒去培养液，加入2.5g/L无菌胰蛋白酶液数滴，摇动后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下轻轻摇动约5min，使贴壁细胞脱落。加入含小牛血清的新鲜培养基4ml，在37℃静置培养4～5h。再小心更换培养液，继续培养，一般传代后3～5天即可收获。
  (7)将培养液移至刻度离心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培养瓶内，置37℃温箱中5min，然后用弯头吸管冲洗贴壁细胞(也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化)。将脱离瓶壁的细胞倒入离心管中，与原培养液相混合，并用少量温热生理盐水冲洗培养瓶，洗下的细胞也一并倒入该离心管，以1000r/min离心10min。
  (8)吸弃上清液，加入预温37℃的0.075mol/L KCl低渗液3～5ml，置37℃10～15min。
  (9)预固定、固定及制片均与外周血细胞染色体标本的制备法相同。 

羊水细胞培养染色体检查注意事项

• 1、染色体检查须于妊娠16~20周时取羊水标本。
  2、这些先天性遗传病的染色体有增多、缺乏、易位、倒置等数量和结构的异常，常表现为一种综合征。如多发性畸形、生长迟缓和智力缺陷等，多数导致胎儿流产、早产或死产。