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血液碳氧血红蛋白

血液碳氧血红蛋白概述

一氧化碳(CO)为无色气体,有微弱的臭味。CO是一种常见的严重危害人体健康的窒息性化学毒物,主要表现在它与血液中的血红蛋白(Hb)结合,形成碳氧血红蛋白(COHb)后,使Hb失去输氧能力。严重CO中毒时,可因组织缺氧而导致死亡。因此,血中COHb浓度的监测在健康监护方面具有重要意义。 

血液碳氧血红蛋白正常值

  • 定性:阴性。
    定量:不吸烟者0~0.023(0~2.3%),吸烟者0.021~0.042(2.4%~4.2%,<6.5%)。 

血液碳氧血红蛋白临床意义

  • 升高见于一氧化碳中毒(CoHb>50%致死)。 

血液碳氧血红蛋白检查方法

  • 1、碳氧血红蛋血红蛋白定性试验:
    ①取试管2支,各加蒸馏水3~5ml,一管加患者血液3滴,另一管加正常人对照血3滴,混匀。此时。如患者血中有一氧化化碳,则血液呈樱桃红色。
    ②每管各加50g/L NaOH 1滴,轻轻混合,正常对照管呈绿褐色,如患者血液中有碳氧血红蛋血红蛋白,则溶血液仍呈樱桃红色,为阳性;如与正常对照色泽一致为阴性。
    2、碳氧血红蛋血红蛋白双波长定量测定:
    ①F值制定:制备Hb溶液(不含COHb)和饱和COHb溶液(COHb含量为100%)。取不吸烟并于近期无CO接触史者的全血50μl,加入6.0ml试剂Ⅱ中,放置5min,使充分溶血。另取两只25.0ml容量瓶,每瓶准确加入上述溶血液2.0ml,在通风橱内,其中一瓶通入空气5min;另一瓶通入煤气(CO)1min,然后通入氮气2min。每瓶加入Na2S2O4 250mg,加试剂Ⅰ至刻度,加塞颠倒3~5次,使其溶解。10min后,用420nm和432nm两波长比色,以试剂Ⅱ调零,记录AHb420、AHb432、ACOHb420、ACOHb432。根据比尔定律:A=a·b·c,因为Hb和COHb均来自同一份样,血红蛋白含铁摩尔浓度(c)相同,比色条件相同(b),故:

    应用上法,测得F值分别为F1=1.3041;F2=0.5742;F3=1.8627。
    ②样品测定:取小试管一支,加试剂Ⅱ1.2ml,加入常规采取的指血10μl,混匀5min使之溶血,另取带塞试管一支,取上述溶血液0.2ml与2.3ml试剂Ⅰ相混合,加Na2S2O4 25mg,加塞颠倒使其溶解,10min后用试剂Ⅱ调零,在窄带宽型分光光度计上用420nm和432nm两个波长比色,记录A420和A432。 

血液碳氧血红蛋白注意事项

  • 1、碳氧血红蛋白定性试验:
    ①观察结果须及时,否则樱桃红色逐渐褪去,不易分辨。
    ②本试验敏感性较差,血液中一氧化碳含量到一定程度时才显阳性。如患者事先已采取通气措施,血中一氧化碳含量下降,试验可阴性。但临床症状、体征仍可能存在。
    2、碳氧血红蛋白双波长定量测定:
    ①COHb定量测定中,没有标准品,确定公式中F1,F2,F3的值是COHb准确定量的前提,虽然有文献提供F值,但由于各实验室的设备条件不完全一致,如分光光度计的单色光波长宽度、波长误差等,因此不宜直接套用文献F值,应依据所使用的分光光度计确定F值。F值确定后,只要仪器条件不改变,可以一直使用,故不会增加常规样品测定的工作量。
    ②在制备100%饱和度COHb(用于制定F值)时,如无民用煤气,也可用化学方法制备CO:取甲酸100ml和硫酸150ml混合,产生的气体依次通入NaOH(5mol/L)、水和CaCl2(0.5mol/L)中进行纯化后收入乳胶手套内备用。
    ③本法的方法学评价结果:样品显色后,30min内呈色稳定;重复试验结果(n=20):=10.41%,s=0.21,CV3.7%;回收率为92.7%~106.3%。 

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