Nature子刊:CRISPR再立功,人类首次实时观测活细胞内基因运动
对于弗吉尼亚大学(University of Virginia)Mazhar Adli教授来说,这些在电脑屏幕上飞舞的小点点,代表了他梦想的实现。这些荧光点的实时移动,指明了一种从未有过的方式,让我们有望对人类基因组、癌症和遗传疾病产生新的理解。
新技术对HeLa细胞17号染色体上一个片段的实时观测(图片来源:《Nature Communications》)
Mazhar Adli教授的团队开发了一种能够实时跟踪活细胞内基因的方法,可以让特定的基因片段发光。这样,人们就能够以三维的视角观测到基因在细胞内的位置和运动路径,就像用天文望远镜观察太空中的星星一样。这一重要突破发表在近期的《自然》子刊《Nature Communications》上。
在细胞中的定位以及与其他基因的相对位置,会对一个基因的效应产生重要的影响。 因此,针对特定基因在细胞中的三维定位将有望帮助科学家以一种新的视角,大大加深对我们理解基因如何工作和相互作用,以及对我们健康的影响。
“这个梦我已经做了很久,”Mazhar Adli教授说道:“我们能够在活细胞中对基因组中几乎任何一个区域进行实时观测,而且效果很好。采取传统的标准方法,你基本上永远都不会得到这样的数据,因为你必须杀死细胞才能进行此种成像,但是我们现在却可以在活细胞中做到实时成像。”
尽管DNA是线性分子,但也会折叠成三维结构。这时,原本在DNA链上线性距离很远的两个基因,也可能会相互接近,进而发生影响基因功能发挥的相互作用。
新方法采用了CRISPR/Cas9基因编辑系统。研究者在单链引导RNA(sgRNA)的尾部连接了16个重复的MS2 RNA片段,配以失去核酸酶活性的dCas9酶,以避免破坏靶标基因。MS2片段源自噬菌体,其折叠结构可与MS2被壳蛋白(MCP)结合。这时,若以荧光基因标记MCP,便可在光学显微镜下对特定基因进行活细胞成像。实验显示,如果增加MS2片段的重复次数,则可显著提高信噪比和灵敏度,即便对于低重复和非重复基因片段也能进行三维观察。此外,研究者还可以使用CRISPR技术,将特定基因“打开”或“关闭”,然后再来看看会细胞内发生什么。
这一新方法克服了基因成像长期以来存在的限制。“我们曾被告知这是永远都做不到的,” Mazhar Adli教授说道:“是有一些方法能让你看到三维组织结构,但是你必须对数以亿计的细胞进行实验,而且得先杀死这些细胞。我们现在可以在单细胞水平直接观察活细胞,可以对那里发生的一切进行录像。”
为了成像而培养大量的细胞并将其杀死,是一件十分耗时的事情,并且难以弄清楚细胞内部的DNA究竟经历了什么,就像很难从球赛的剪影中看懂足球的规则。Mazhar Adli教授团队开发的新方法,就好比能让人们坐下来,完整地观看一场球赛的录像。“这是一个十分激动人心的事情,”他说道。
用于各型精神分裂症,更适用于病情缓解者的维持治疗。
健客价: ¥15本品适用于有胃肠道功能或部分胃肠道功能而不能或不愿吃足够数量的常规食物以满足机体营养需求的肠内营养治疗的病人,主要用于: 1. 代谢性胃肠道功能障碍 -胰腺炎 -肠道炎性疾病 -放射性肠炎和化疗 -肠瘘 -短肠综合征 -艾滋病病毒/艾滋病 2. 危重疾病 -大面积烧伤 -创伤 -脓毒血症 -大手术后的恢复期 3. 营养不良病人的手术前喂养 4. 肠道准备 本品能用于糖
健客价: ¥95解毒,消肿,止痛。用于中、晚期肿瘤,慢性乙型肝炎等症。
健客价: ¥175本品可用于由敏感菌引起的轻、中度感染,包括1、呼吸系统感染:如急性咽炎、急性扁桃体炎、中耳炎、副鼻窦炎、支气管炎、支气管扩张合并感染、肺炎等;2、肠道感染:如细菌性痢疾、伤寒、感染性肠炎、沙门氏菌肠炎等; 3、胆道感染:如胆囊炎、胆管炎等;4、泌尿生殖系统感染:如膀胱炎、肾盂肾炎、前列腺炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎、子宫附件炎、子宫内感染、子宫颈炎、前庭大腺炎等及由溶脲脲原体、沙眼衣原体所致的
健客价: ¥42用于对其敏感的致病菌引起的下列感染,包括:1下呼吸道感染:如支气管炎、肺炎等;2、上呼吸道感染,如咽炎、鼻窦炎等;3、皮肤及软组织感染,如毛囊炎、蜂窝组织炎、丹毒等。
健客价: ¥9克拉霉素适用于对其敏感的致病菌引起的下列感染,包括:1下呼吸道感染:如支气管炎、肺炎等;2、上呼吸道感染,如咽炎、鼻窦炎等;3、皮肤及软组织感染,如毛囊炎、蜂窝组织炎、丹毒。
健客价: ¥7主要用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等所致的呼吸道感染及皮肤、软组织感染;也可用于支原体肺炎。
健客价: ¥18主要用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等所致的呼吸道感染及皮肤、软组织感染,也可用于支原体肺炎。
健客价: ¥18大环内酯类抗生素。抗菌范围与红霉素相似,主要用于金黄葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等所致的呼吸道感染及皮肤、软组织感染,也可用于支原体肺炎。
健客价: ¥18.9主要适用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等所致的呼吸道感染及皮肤、软组织感染,也可用于支原体肺炎。
健客价: ¥7目前主要用来治疗萎缩性胃炎、浅表性胃炎、食管上皮细胞增生,以及预防由于细胞增生引起的癌变。也可用于各型肝炎的辅助治疗,核黄素缺乏等。
健客价: ¥5.5主要适用于金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌等所致的呼吸道感染及皮肤、软组织和胆道感染,也可用于支原体肺炎。
健客价: ¥18适用于克拉霉素敏感菌所引起的下列感染:1.鼻咽感染。2.下呼吸道感染。3.皮肤软组织感染。4.急性中耳炎、肺炎支原体肺炎、沙眼衣原体引起的尿道炎及宫颈炎等。
健客价: ¥10.81下呼吸道感染:如支气管炎、肺炎等;2、上呼吸道感染,如咽炎、鼻窦炎等;3、皮肤及软组织感染,如毛囊炎、蜂窝组织炎、丹毒等。
健客价: ¥61.本品应用于以下疾病:(1)立克次体病,包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、洛矶山热、恙虫病和Q热。(2)支原体属感染。(3)衣原体属感染,包括鹦鹉热、性病、淋巴肉牙肿、非特异性尿道炎、输卵管炎、宫颈炎及沙眼。(4)回归热。(5)布鲁菌病。(6)霍乱。(7)兔热病。(8)鼠疫。(9)软下疳。治疗布鲁菌病和鼠疫时需与氨基糖苷类联合应用。2.由于目前常见致病菌对四环素类耐药现象严重,仅在病原菌对本品
健客价: ¥61.本品作为首选或选用药物应用于下列疾病:(1)立克次体病,包括流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、洛矶山热、恙虫病和Q热。(2)支原体属感染。(3)衣原体属感染,包括鹦鹉热、性病、淋巴肉牙肿、非特异性尿道炎、输卵管炎、宫颈炎及沙眼。(4)回归热。(5)布鲁菌病。(6)霍乱。(7)兔热病。(8)鼠疫。(9)软下疳。治疗布鲁菌病和鼠疫时需与氨基糖苷类联合应用。2.由于目前常见致病菌对四环素类耐药现象严重
健客价: ¥61.化脓性链球菌引起的急性咽炎、急性扁桃体炎。 2.敏感细菌引起的鼻窦炎、中耳炎、急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作。 3.肺炎链球菌、流感嗜血杆菌以及肺炎支原体所致的肺炎。 4.沙眼衣原体及非多种耐药淋病奈瑟菌所致的尿道炎和宫颈炎。 5.敏感细菌引起的皮肤软组织感染。
健客价: ¥8.5本品适用于敏感细菌所引起的下列感染:1. 支气管炎、肺炎等下呼吸道感染;皮肤和软组织感染;急性中耳炎;鼻窦炎、咽炎、扁桃体炎等上呼吸道感染(青霉素是治疗化脓性链球菌咽炎的常用药,也是预防风湿热的常用药物。阿奇霉素可有效清除口咽部链球菌,但目前尚无阿奇霉素治疗和预防风湿热疗效的资料)。2. 阿奇霉素可用于男女性传播疾病中由沙眼衣原体所致的单纯性生殖器感染。阿奇霉素亦可用于由非多重耐药淋球菌所致的单纯
健客价: ¥8.2