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鼠红细胞花环形成试验

鼠红细胞花环形成试验概述

B淋巴细胞与抗体合成有关,是体液免疫反应的效应细胞。B细胞表面带有膜表面免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体及补体受体等。它可与抗原抗体复合物的Fc段牢固结合。选用鸡或羊红细胞,用相应的抗红细胞抗体致敏成EA复合物,B细胞的Fc受体能与EA结合形成花环,称EA花环。如果EA复合物再加上补体,与B细胞的补体受体结合,则形成EAC花环。B细胞表面有鼠RBC受体,能与小鼠RBC结合,形成鼠红细胞花环(M-RFC),主要结合于带有IgM受体的B细胞上,形成M-RFC的多为幼稚B细胞。本试验临床上主要用于检测B淋巴细胞的数量及判断体液免疫水平。 

  • 检查部位 其他
  • 科室 体检、保健科
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鼠红细胞花环形成试验正常值

  • 结果:镜下计数200个淋巴细胞,凡吸附3个或3个以上小鼠红细胞的淋巴细胞为B淋巴细胞,计算出小鼠细胞花环(ME花环)的百分率。正常人外周血ME花环百分率为5%-10%。 

鼠红细胞花环形成试验临床意义

  • 慢性淋巴细胞白血病患者外周血液的ME花环百分率高达60%-80%,而无丙种球蛋白血症、严重联合型免疫缺陷等,ME花环百分率减低或缺如。 

鼠红细胞花环形成试验检查方法

  • (1)取1ml上述小鼠红细胞悬液,加3ml生理盐水混匀,1500r/min,离心10min,共洗3次,最后用生理盐水配成1%小鼠红细胞悬液(约1.4×108个细胞/ml)。
    (2)取受检者1.5ml肝素抗凝血,用淋巴细胞分层液分离淋巴细胞,用含20%小牛血清Hank液调整细胞浓度为2×107/ml。
    (3)取淋巴细胞悬液0.1ml,加等量1%小鼠红细胞悬液,混合后置37℃水浴10min,500r/min,离心10min,放4℃冰箱2~3h。
    (4)用毛细管吸取0.05ml上清液,加1滴2g/L美蓝溶液,轻轻旋转使混匀,取1滴混合物放在玻片上,覆以盖玻片,待细胞下沉后,用高倍镜检查。 

鼠红细胞花环形成试验注意事项

  • (1)温育时间:ME花环百分率随温育时间延长而逐渐增加,温育1h,ME百分率为7.4±3.1%,而温育18h,增至18.3±3.8%,温育72h后,花环数又逐渐降至3.4±7.1%。
    (2)培养液:以用Tc199培养液最为适宜,其结果及重复性均好。用Hepes缓冲的RPMl 1640培养液洗涤和重悬淋巴细胞和红细胞,导致细胞趋向聚集,而形成大块细胞,从而产生不可靠的结果。
    (3)红细胞与淋巴细胞的最适比例约为35∶1,比例>60∶1,或比例<25∶1时,ME花环数可减低。
    (4)保存MRBC的培养液:在Alsever液中,MRBC 4℃保存1周仍可产生稳定的花环数,而在PBS,生理盐水或Tc199培养液中保存的MRBC,随着保存时间延长,花环数逐渐下降,保存72h后,只能看到小数花环或无花环形成细胞。 

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