血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验概述
HbF的抗碱性及抗酸性都较正常血红蛋白(HbA)为强,因此,血片经酸洗脱后,含HbF的红细胞因抗酸而不被脱色,能被伊红染成红色。含HbA或只含及少量HbF的红细胞则被酸洗脱,仅留下红细胞膜的空影。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验正常值
着色细胞:0-<1%。
新生儿:2/3。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验临床意义
(1) 多数红细胞染成红色:β-地中海贫血重症型。
(2) 少数红细胞染成红色:β-地中海贫血轻症型、再生障碍性贫血、溶血性贫血。
(3) 染色深:遗传性HbF增多症纯合子型。
(4) 染色浅:遗传性HbF增多症杂合子型。
(5) 染色深浅不均匀:β-地中海贫血轻症型。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验检查方法
1、按常规法制备血涂片,自然干燥1h,再用80%乙醇固定5min(柠檬酸盐抗凝血在4℃冰箱内保存3天可以使用),水洗待干。
2、将固定后血膜放37℃,pH3.3的磷酸盐柠檬酸缓冲液中,保温浸洗5min。
3、冲洗干燥后,在苏木素染色液中染白细胞1min,以免误认为阳性红细胞。
4、水洗后,用伊红染液染红细胞1min,再水洗,干后镜检。
5、在油镜下,含有Hb F的红细胞被伊红染液染成鲜红色,为阳性红细胞;仅留下淡影的细胞膜为阴性红细胞。计数1000个红细胞中阳性红细胞所占百分率。
血红蛋白F细胞酸洗脱染色试验注意事项
1、血片制成后,在2h内染色,否则可出现假阳性反应。要求涂片薄,细胞平铺分散。
2、缓冲液的pH、温度、洗脱时间应严格控制,否则影响测定结果。
3、也可用稀释瑞氏染色液作对比染色。