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固相酶免疫测定技术

固相酶免疫测定技术概述

固相酶免疫测定主要是指ELISA,其基本原理是:使抗原或抗体结合到某种固相载体表面(包被),并保持其免疫活性;用酶标记(另一种)抗原或抗体,保留其免疫活性和酶活性;在测定时,把待测标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应;用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例;加入酶反应的底物后,底物被酶催化显色,故可根据颜色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,具有放大反应的效果,从而使测定方法达到很高的敏感度。根据测定对象的不同,ELISA有多种反应类型。 

固相酶免疫测定技术正常值

  • 不同项目检测的正常值不同,一般小于一定的范围内。或者是阴性结果。 

固相酶免疫测定技术临床意义

  • 异常结果:酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的。因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。 
    需要检查的人群:一般是免疫力低下或者出现有关免疫学疾病的患者需要检查。 

固相酶免疫测定技术检查方法

  • 测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便讯速,特异性强。 

固相酶免疫测定技术注意事项

  • 一般要求早晨空腹检查,禁忌暴饮暴食和辛辣食品后检查。
    在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过1周测定的需低温冰存。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。 

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