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血浆游离皮质醇

血浆游离皮质醇概述

游离型皮质醇有生物活性,可进入细胞内,在肝脏代谢而失去活性,并可经肾小球滤过进入尿中。尿中游离皮质醇含量与血浆游离皮质醇的含量成正比。

血浆游离皮质醇正常值

  • 放射免疫分析法(RIA法)
    上午(8:00)166.5~441.4nmol/L。
    下午(16:00)55.18~248.3nmol/L。
    午夜(0:00)63.4~129.6nmol/L。

血浆游离皮质醇临床意义

  • 1、升高见于皮质醇增多症(库欣综合征)、异位产生ACTH的肿瘤(燕麦型肺癌、胰腺癌、甲状腺癌、甲状旁腺癌、卵巢癌、睾丸癌、大肠癌、胆囊癌、乳腺癌、纵膈瘤等)、垂体前叶功能亢进症。
    2、降低见于肾上腺皮质功能低下、艾迪生病、西蒙病(Sinmond病)、席汉病(sheehan病)、先天性肾上腺皮质增生症、长期应用类固醇激素。

血浆游离皮质醇检查方法

  • 1、血浆和尿样品测定:取0.1ml血浆或万分之一的24h混合尿,都用蒸馏水稀释至0.5ml,于10ml抽提管中,加二氯甲烷5ml和0.1mol/L NaOH0.2ml,抽提5min,静止片刻弃去上层液,下层二氯甲烷抽提液用水洗2次,每次1ml,摇1min,离心1500r/min 3min,弃去水层,取二氯甲烷提取液双份各1ml(复管),45℃压缩空气吹干,加3H-皮质醇7000cpm/10μl,45℃吹干,各管加0.2ml抗血清应用液(1∶3800用1g/L GPS稀释),摇匀置4℃过夜,以下步骤同标准管。
    2、标准曲线制作:0,0.1,0.3,0.6,1.0,2.0,4.0ng(各点做复管),各管加3H-皮质醇10ml,吹干,每管加抗体0.2ml,另取四管各加3H皮质醇10ml,分别加1g/L GPS 0.7和0.2ml其中二管作总脉冲测定管,另二管作非特异性测定(BN%)摇匀后,放4℃过夜。次日各管加5g/L GPS0.1ml摇匀,再加2.5g/L DCC0.5ml(总管T不加)。分离游离与结合物;摇匀4℃停放10min,3000r/min离心10min吸取上清液0.4ml,加到8ml闪烁液中,混旋1min,避光4h后,用液烁计数仪测量。 

血浆游离皮质醇注意事项

  • 1、各管加入3H或标准必须吹干,然后加抗体,因为3H或标准是乙醇配制,否则会损害抗体。
    2、加定量的3H须根据实验情况而定(本文加7000cpm),在相应的范围内3H抗原加入量越少灵敏度就越高。 

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